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Huc, Emilie. O-mycoloylation : caractérisation d'une nouvelle modification post-traductionnelle de petites protéines d'enveloppe chez les Corynebacterineae

Huc, Emilie (2011) O-mycoloylation : caractérisation d'une nouvelle modification post-traductionnelle de petites protéines d'enveloppe chez les Corynebacterineae.

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Résumé en francais

Les Corynebacterineae sont des bactéries caractérisées par la présence d'une paroi atypique pour des bactéries Gram+ avec notamment la présence d'une membrane externe appelée mycomembrane. Cette membrane est constituée majoritairement d'acides mycoliques, acide gras à longue chaîne a-ramifiés et béta-hydroxylés spécifique des Corynebacterineae, que l'on retrouve soit liés à l'arabinogalactane formant le feuillet interne, soit au tréhalose formant le feuillet externe. Dans la plupart des genres de ce sous-ordre, des protéines ont été identifiées au niveau de la mycomembrane. C'est le cas en particulier, des mycoloyltransférases permettant le transfert des acides mycoliques sur leurs accepteurs finaux mais aussi des porines permettant le passage des solutés nécessaires à la survie de la bactérie. Au cours de ce travail, nous avons étudié certaines protéines de la mycomembrane en particulier PorA et PorH chez la souche C.glutamicum ATCC13032. Nous avons démontré, en combinant différentes techniques de biochimie des protéines et de spectrométrie de masse, que les protéines PorA et PorH ainsi qu'une troisième protéine inconnue appelée protéine X sont O-acylées par un acide mycolique, modification jamais observée chez les bactéries. Nous avons montré que cette modification s'effectue sur la serine 15 de PorA et qu'elle est nécessaire à l'activité porine cation-sélective de l'hétérooligomère PorA-PorH chez C. glutamicum ATCC13032. Dans un deuxième temps, nous avons identifié l'enzyme responsable de la mycoloylation par interruption du gène candidat. Il s'agit d'une mycoloyltransférase qui se différencie des autres mycoloyltransférases connues par une boucle d'insertion au niveau de sa structure responsable d'une spécificité de substrat différente. L'identification de cette enzyme nous a permis de rechercher des protéines orthologues chez l'ensemble des Corynebacterineae. L'étude des candidats devrait permettre de savoir si ce type de modification post-traductionnelle est commun au sous-ordre des Corynebacterineae.

Sous la direction du :
Directeur de thèse
Tropis, Maryelle
Ecole doctorale:Biologie, santé, biotechnologies (BSB)
laboratoire/Unité de recherche :Institut de Pharmacologie et de Biologie Structurale (IPBS), UMR 5089
Mots-clés libres :Corynebacterium glutamicum - Enveloppe - Modification post-traductionnelle - Acides mycoliques - Porines
Sujets :Biotechnologies, agronomie
Déposé le :09 Jan 2012 10:14