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Filipe, Cédric. Etude de l'effet de l'oestradiol sur la réendothélialisation

Filipe, Cédric (2007). Etude de l'effet de l'oestradiol sur la réendothélialisation.

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Résumé en francais

Les travaux menés au sein de notre laboratoire depuis plusieurs années, ont permis de perfectionner un nouveau modèle murin permettant l'étude de la réendothélialisation. Contrairement au modèle classique de agression endovasculaire, qui induit une désendothélialisation stricte de la carotide, le agression périvasculaire, réalisé par l'application d'un champ électrique, induit une décellularisation totale de l'artère. Notre laboratoire a démontré que le 17beta-oestradiol (E2) induisait une accélération de la réendothélialisation et que cet effet était médié par le récepteur alpha des oestrogènes (ER-alpha). La première partie de mon travail a consisté à comparer ces deux modèles : endovasculaire et périvasculaire. Nous avons ainsi démontré que malgré leurs nombreuses différences, dont la présence ou non de cellules musculaires lisses, la réendothélialisation se réalise aussi efficacement. De plus, grâce à l'application de l'imagerie confocale dite " en face ", nous avons décrit les évènements précoces et tardifs de cette cicatrisation endothéliale. L'E2 accélère précocement la migration et augmente la prolifération des cellules endothéliales dans la zone en amont du stress. Trois jours après la lésion périvasculaire, la zone réendothélialisée et la zone en amont du stress sont élargies par l'E2. Enfin, par l'utilisation de souris déficientes pour le domaine transactivateur 1 (AF1), nous avons démontré pour la première fois in vivo, que ce domaine était indispensable aux effets de l'E2. La seconde partie de ma thèse a consisté à déterminer les mécanismes cellulaires et moléculaires, impliqués dans ce processus de réendothélialisation. Afin de comprendre si ce processus de cicatrisation était uniquement un phénomène mettant en jeu des cellules locales, nous avons réalisé le même type d'expériences mais dans un modèle de souris chimères. En greffant de la moelle de souris déficientes en ER-alpha a des souris sauvages, et vice et versa, nous avons ainsi pu mettre en évidence, pour la première fois, qu'une coopération entre la moelle osseuse et les cellules locales était indispensable. Nous nous sommes aussi intéressé à un facteur de croissance: le FGF2. L'E2 augmente le nombre d'EPCs circulant chez des souris sauvages (FGF+/+). A l'inverse, chez des souris déficientes en FGF2 (FGF2-/-) les effets de l'E2 sur la cicatrisation et les EPCs sont abolis, démontrant ainsi que le FGF2 est requis pour ces deux effets. Nous démontrons également que l'E2 induit une augmentation spectaculaire l'expression du FGF2 hmw et FGF2 lmw au niveau de la moelle osseuse (MO). Afin d'évaluer le rôle joué par ce FGF2 d'origine médullaire, nous avons développé des souris chimères. Chez des souris FGF2 +/+ greffées avec de la moelle de souris FGF2-/-, on constate une perte de l'effet de l'E2 sur l'augmentation de la réendothélialisation et des EPCs circulant. A l'inverse, l'E2 chez des souris FGF2 -/- greffées avec de la moelle de souris FGF2 +/+, conserve ces activités comme chez les souris FGF2+/+, démontrant ainsi que seul le FGF2 d'origine médullaire est nécessaire aux effets de l'E2. En conclusion ces travaux nous aurons permis de décrire certains des mécanismes cellulaires et moléculaires médiant les effets de l'E2. En effet, nous démontrons que seul le ER-alpha médie les effets de l'E2, mais que son domaine AF1 n'est pas nécessaire. Nous avons également déterminé, que dans le processus de réendothélialisation, une coopération entre la moelle osseuse et les cellules locales est indispensable à l'effet de l'E2 dans ce modèle. Enfin, nous avons mis en évidence que le FGF2 d'origine médullaire était indispensable à l'effet accélérateur de l'E2 sur la réendothélialisation.

Sous la direction du :
Directeur de thèse
Arnal, Jean-François
Ecole doctorale:Biologie, santé, biotechnologies (BSB)
laboratoire/Unité de recherche :Institut national de la santé et de la recherche médicale (INSERM)
Mots-clés libres :17ß-estradiol (E2) - réendothélialisation - imagerie confocale "en face" - progéniteurs endothéliaux - cellules endothéliales
Sujets :Sciences du vivant
Déposé le :14 Apr 2008 14:36