Cottarel, Jessica. La jonction d'extrémités non-homologues : une nouvelle fonction pour le complexe de ligature

Résumé en francais

Chez les vertébrés, la voie majoritaire de réparation des cassures double brin de l'ADN est la jonction d'extrémité non homologue (NHEJ). Afin d'initier la réparation, la protéine hétérodimérique Ku se lie aux extrémités de l'ADN et recrute la sous unité catalytique de la protéine kinase dépendante de l'ADN (DNA-PKcs) pour former la DNA-PK. La formation d'une synapse par deux DNA-PK (une sur chaque extrémité de l'ADN) entraîne l'autophosphorylation de la kinase. Le complexe XRCC4/Ligase4 catalyse l'étape finale de ligature avec l'aide de Cernunnos/XLF. Au cours de ma thèse, nous avons prouvé qu'il existe un défaut de maintien de la synapse ainsi que de l'autophosphorylation de la DNA-PKcs dans les extraits cellulaire dépourvu de Ligase4. De plus, dans une expérience de reconstitution mettant en jeu des protéines purifiées, la Ligase 4 stimule l'autophosphorylation de la DNA-PKcs. Un défaut d'autophosphorylation de la kinase dans les cellules déficientes pour la Ligase4 a également était prouvé. Enfin, notre travail montre une contribution de Cernunnos-XLF dans ce rôle précoce du complexe de ligature au cours de la NHEJ. Toutes ces données nous permettent d'émettre l'hypothèse de la formation d'un complexe supramoléculaire précoce, comprenant la DNA-PK et le complexe XRCC4/Ligase4/XLF, sur les extrémités de l'ADN au cours de la réaction de NHEJ.