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Leduc, Claire. Impact de la délétion de TRRAP ou MSH2 sur le développement des cellules B et la commutation isotypique

Leduc, Claire (2009) Impact de la délétion de TRRAP ou MSH2 sur le développement des cellules B et la commutation isotypique.

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Résumé en francais

TRRAP est un composant de différents complexes histone-acetyltransférases (HAT). Elle peut également s'associer au complexe MRN dépourvu d'activité HAT. TRRAP est impliquée dans différents processus nécessitant une accessibilité accrue de l'ADN tels que la transcription et la réparation de l'ADN. La délétion du gene Trrap chez la souris est létale aux stades précoces du développement embryonnaire. Nous avons donc recouru a une inactivation conditionnelle, restreinte aux lymphocytes B, en utilisant le système Cre-loxP, ou Cre se trouve sous le contrôle des éléments transcriptionnels de CD19, un marqueur spécifique de la lignée B.L'analyse phénotypique et moléculaire de populations cellulaires B des souris Trrap-/-/CD19Cre/Cre m'a permis de montrer que TRRAP jouait un rôle important dans le développement B et dans la CSR. Une analyse plus poussée au niveau de la cellule unique par" single-cell PCR " à différents stades de développement, a révélé que TRRAP était absolument requise pour la prolifération des cellules B, et que les effets de sa déficience sont plus prononcés dans les cellules proliférantes que quiescentes. Mes résultats suggèrent fortement que TRRAP possède un rôle central et général dans la régulation du cycle cellulaire. La protéine MSH2 est impliquée dans le mécanisme de réparation des mésappariements(mismatch repair). Son rôle précis dans la CSR est encore inconnu, sa déficience provoque une faible diminution de la CSR. Le modèle en vogue stipule qu'elle jouerait un rôle crucial dans les cassures double brin générées en dehors des motifs répétés des régions S. Pour tester ce modèle, j'ai analyse la CSR dans des souris déficientes en MSH2 et en motifs répétés de la region Sµ. L'analyse des souris mutantes a montre que la double déficience abolissait complètement la CSR. Ce blocage n'est pas du a une inhibition de la transcription des régions S ni a un défaut de prolifération (deux pré-requis a la CSR) mais plutôt a l'absence de cassures au niveau de l'ADN malgré la présence de "points chaud" pour AID. Par ailleurs, mes résultats montrent que le domaine d'action de MSH2 dans la region Sµ s'étend bien au-delà des domaines delimités par les boucles R.

Sous la direction du :
Directeur de thèse
Khamlichi, Amine Ahmed
Ecole doctorale:Biologie, santé, biotechnologies (BSB)
laboratoire/Unité de recherche :Institut de Pharmacologie et de Biologie Structurale (IPBS), UMR 5089
Mots-clés libres :TRAAP - MSH2 - Switch - Immunoglobulines - Lymphocyte B - Développement - Locus IgH - Histone
Sujets :Sciences du vivant
Déposé le :01 Dec 2010 17:11